ÈESKÁ UROLOGIE / CZECH UROLOGY – 4 / 2017

295 Ces Urol 2017; 21(4): 289–298 ORIGINÁLNÍ PRÁCE Graf 2. Závislost poètu spermií s nízkou integritou akrozomu na poètu apoptotických spermií. Poèet spermií s nízkou integritou akrozomu (Hs-8 pozitivních) se zvyšuje s rostoucímpoètemapoptotických spermií v ejakulátu. Annexin V – FITC a propidium jodid byly použity k oznaèení apoptotických spermií. Fyziologické hodnoty: <30 % spermií s nízkou integritou akrozomu (Hs-8 poz.), <50 % apoptotických spermií v ejakulátu Graph 2. Number of spermwith low integrity of acrosome depends on the percentage of apoptotic sperm. The percentage of sperm with low acrosome integrity (Hs-8 antibody positive sperm) increases with the percentage of apoptotic sperm in semen. Annexin V – FITC and propidium iodide were used to mark apoptotic sperm. Phys- iological values: <30 % spermwith low integrity of acrosome, <50 % of apoptotic sperm 0 10 20 30 40 50 60 70 80 90 100 0 10 20 30 40 50 60 70 80 90 100 % spermií Hs-8 pozitivních % apoptotických spermií poškozené zárodeèné buòky, èímž se snižuje riziko vytváøení spermií s nekvalitní DNA. Smrt apoptó- zou je osudem všech spermií, které se po ejakulaci dostaly do pohlavních cest ženy a nebyly natolik úspìšné, aby oplodnily vajíèko. Apoptotické spermie jsou bezpeènì odklizeny imunitním systémembez vyvolání zánìtlivé reakce. Z pohledu fertility není problémapoptóza samotná, ale spíše její naèasování a pomìr živých a apoptotických spermií v ejakulátu. Jedním z prvních znakù apoptózy je aktivace tvorby ROS (reaktivních forem kyslíku) mitochondri- emi spermií, pøi níž dochází ke zmìnám v membrá- novém potenciálu mitochondrií, postupné ztrátì pohyblivosti spermií, aktivaci kaspáz, endonukleáz a zmìnám ve složení membrány bunìk (14, 17). Pù- sobením oxidaèního stresu dochází ve spermiích k poškození DNA a na povrchu apoptotických sper- mií se objeví fosfatidylserin, který využíváme pøi de- tekci apoptotických spermií. Cytometrické vyšetøení apoptotických spermií pomocí AN a PI je velmi rychlé a metodicky jednoduché. Na našem pracovišti bylo vyšetøení apoptózy spermií zaøazeno spoleènì se spermiogramem do standardního vyšetøovacího schématu mužù z párù se sníženou fertilitou. Vyšší zastoupení apoptotických spermií (>50 % apoptotických spermií) bylo zjištìno u 37,6 % vzor- kù získaných od 800 pacientù. Velmi pøínosné je toto stanovení u normozoospermikù. Zjistili jsme, že 16,9 % normozoospermikù mìlo vysoké zastou- pení apoptotických spermií, což u nich zvyšovalo riziko vyšší fragmentace DNA. Tato hodnota odpo- vídá údajùm uvedeným v publikaci Agarwal et al. (2), která uvádí, že 15 % normozoospermikù má sníženou fertilitu, která se projeví nízkou kvalitou