93 Ces Urol 2024; 28(2): 89–96 PŘEHLEDOVÉ ČLÁNKY zím pátém (2010) a v současném šestém (2021) vy‑ dání Manuálu. V klinické praxi je nutné tyto hodnoty posuzovat s vědomím, že mohou i u zdravých mužů v průběhu opakovaných vyšetření v čase významně kolísat. Proto se doporučuje spermiogram s časo‑ vým odstupem, obvykle 2–3 měsíců, minimálně jednou zopakovat (1). ROZŠÍŘENÉ VYŠETŘENÍ – DALŠÍ MOŽNOSTI POSOUZENÍ KVALITY SPERMIÍ I u normozoospermiků se může stát, že kvalita spermií není dostatečná a po oplození oocytu se netvoří kvalitní embrya nebo se nedaří ženám otěhotnět, ať už přirozenou cestou nebo pomocí technik asistované reprodukce. Jednou z možných příčin nezdaru může být vyšší fragmentace DNA ve spermiích. Autoři do Manuálu zahrnuli několik metod vyšetření fragmentace DNA spermií (SDF- Sperm DNA Fragmentation) a také genetické vy‑ šetření spermií metodou FISH (fluorescence in situ hybridization), které zjišťuje přítomnost mutací a chromozomálních aberací (především aneuploidií chromozomů 13, 18, 21, X a Y). Míra zastoupení spermií s poškozenou DNA významně narůstá u mužů s hormonálními one‑ mocněními, varikokélou, chronickými infekcemi a u kuřáků. K fragmentaci DNA může docházet během zrání spermií. Bylo prokázáno, že fragmen‑ tace DNA spermií odebraných přímo z varlete (me‑ todou TESE) je nižší než u spermií v ejakulátu (9). Existuje více metod k posouzení integrity DNA. Metody TUNEL (terminal deoxynucleotidyl transfe‑ rase mediated deoxyuridine triphosphate nick end labeling) a COMET test využívají přímého značení zlomů DNA, zatímco u tzv. nepřímých metod, jako jsou SCSA (sperm chromatin structure assay) a SCD (sperm chromatic dispersion test) se k označení poškozené DNA požívá nespecifické značení. Ně‑ které metody využívají průtokovou cytometrii pro analýzu výsledků, jiné jsou analyzovány mikrosko‑ picky. Vyšetření fragmentace se liší i hodnocením. U TUNEL se přímo uvádí % spermií s fragmento‑ vanou DNA a laboratoř stanoví hraniční hodnotu, pro kterou je vyšší pravděpodobnost nízké fertility. U SCSA se používá DFI (DNA fragmentation index). Hodnoty DFI nad 30 % jsou spojeny s častějším výskytem spontánních potratů a chybným vývo‑ jem embryí, jak po přirozeném oplodnění, tak po intrauterinní inseminaci. Hodnoty DFI nad 50 % mohou souviset s horšími výsledky po in vitro oplození (10, 11, 12). I zde nejsou hraniční hodnoty striktně dány. Manuál doporučuje, aby si je každá laboratoř určila sama. Výskyt genetických příčin mužské neplodnos‑ ti významně roste s klesající koncentrací spermií v ejakulátu. Proto je dle Doporučení EAU gene‑ tické vyšetření indikováno u mužů s azoospermií a oligospermií (koncentrací spermií pod 10 mil/ml) (13). Standardně je vyšetřován karyotyp ke zjištění numerických a strukturálních anomálií chromo‑ zomů, mutace genu pro cystickou fibrózu (CFTR) a mikrodelece chromozomu Y, protože některé typy mikrodelecí tohoto chromozomu (AZFa, AZFb) spermatogenezi vylučují. Muži s výrazně nízkou koncentrací spermií (pod 1 mil/ml) mají až 10ná‑ sobný nárůst incidence (4 %) autozomálních struk‑ turálních poruch ve srovnání s normální populací. Muži s neobstrukční azoospermií mají vyšší riziko genetických poruch, zvláště anomálií pohlavních chromozomů (gonozomů), jako je např. Klinefelte‑ rův syndrom (14). Autoři Manuálu se věnují pouze genetickému vyšetření spermií, ostatní genetické metody týkající se somatických buněk nezmiňují. Podrobně je popsána metoda fluorescenční hyb‑ ridizace in situ (FISH), která je vhodná k průkazu aneuploidie spermií. Standardně se touto me‑ todou vyšetřují autozomy 13 (Pataův syndrom), 18 (Edwardsův syndrom), 21 (Downův syndrom) a oba gonozomy (Turnerův a Klinefelterův syn‑ drom). Zvláště gonozomální aneuploidie jsou často spojeny se závažnou poruchou spermatogeneze, selháním implantace vajíčka a opakovanými potra‑ ty (15). Proto je tento test doporučován jako scree‑ ningový nástroj u neplodných párů s poruchami vývoje vajíčka/plodu, méně často pak u těžkých oligozoospermiků. Mezi další metody používané pro detailnější vyšetření ejakulátu patří i stanovení přítomnosti
RkJQdWJsaXNoZXIy NDA4Mjc=